1. 不要迟到早退，上班时间（除中午12:00-13:00和下午17:00-18:00吃饭时间）不要无故离开实验室。
2. 保持实验室清洁。根据各自的卫生负责区域每两天清理实验室一次（包括仪器、电脑、实验台、地面、墙壁等等）。为防止灰尘飞扬，应该用湿抹布和湿拖把清理，不能用干抹布和扫帚清理。要经常检查和保持显微镜系统清洁，如：聚光镜、物镜、目镜、载物台和仪器表面等。
3. 要经常注意实验室的温度，检查实验室空调是否处于正常工作状态。实验完毕离开实验室前，要关好门、窗、水、电，确保仪器安全。
4. 时刻注意停电通知，根据停电时间通知学生安排好实验。停电复电后，应注意实验室空调是否处于工作状态，及时打开实验室空调。
5. 实验室内空调、水电维修时，应用塑料台布将仪器盖上，以防维修时水漏到仪器上。
6.注意防震台是否有气压，没气时要及时更换气瓶。防震台一律使用空气。
7. 每周检查一次计算机容量，发现硬盘容量小于 5 G 时，应检查各个实验者的数据量和时间，将超过一周的数据删除。
8. 实验结束后应及时填写仪器使用记录。每月由指定的技术员（马倩茹、陈旭鑫和王永红）统计仪器使用量和课题组应收费用，每月初将上个月的统计报表发给各组PI和管家。
9. 如果同时有多个学生需要带实验时，应按照先来后到、先简后繁、先熟练后生疏的次序协助学生实验。
10. 实验开始时，应帮助学生找到标本焦平面、设置好仪器参数（激光强度、Pinhole 大小、PMT 增益、滤光片、聚光镜、DIC、相差等）、并采集一张符合标准的图像，然后再让学生独立实验。在设置仪器参数的时候，要边讲解边设置。
11. 在设置多荧光标记标本的实验参数时，要一个通道一个通道按次序设置（NIKON的共聚焦显微镜可使用 Preview 和 Capture 分别保存预览参数和正式采图参数）。
12. 对于首次实验或者不能熟练使用显微镜的学生，应首先讲解仪器的工作原理和仪器的操作步骤， 然后按先做示范、边讲解边示范、边讲解边让学生自己动手采集图像的步骤，逐步教会学生掌握仪器操作。
13. 在示范和操作显微镜时要注意以下仪器操作要点：
（1）检查物镜是否清洁、检查显微镜镜油有没有结晶或浑浊物；
（2）物镜的盖玻片厚度校正是否设置正确；
（3）明视野光路是否清洁、无灰尘；
（4）物镜的类型是否选择正确（首选高数值孔径 Plan-APO 物镜、用水镜来观察活标本等）；
（5）共聚焦针孔设置是否正确（一般选 1 Airy Unit）；
（6）合适的扫描速度和平均次数；
（7）合适的采图分辨率（根据 Nyquist 采样定律，采图分辨率应最起码为所需观察的最小物体空间尺度率的 1／2－1／3）；
（8）荧光定量分析实验要注意图像亮度不要过亮、PMT 的 Offset 不要过高， 应使用 Hi-Lo 调色板或 Line-Profile 来检查图像亮度；
（9）倒置显微镜更换标本和物镜时要先把物镜降到最低位置；
（10）聚焦时要注意样品和物镜的距离（可参考显微镜前方小显示屏中物镜的Z轴位置读数），避免物镜升得过高撞及样品损坏物镜；
（11）观察或采集载玻片边缘的标本时要注意物镜离样品架之间的距离，避免物镜顶到样品架造成设备损坏。
14.在学生实验过程中，应经常检查采图参数是否正确、仪器工作状态是否正常、学生的操作是否正确。 及时关闭不使用的激光器，及时收纳不需要使用的物镜。
15．使用恒温加热台时要注意： 打开盖子和合上盖子时不要朝一个方向缠绕电线、通气时要注意水槽中的水不能溢出。使用3-4小时后，应向水槽中补足超纯水。
16．使用灌流系统的实验要注意： 要在物镜或聚光镜上加一层保鲜膜，检查负压泵是否正常工作，防止实验溶液溢出在仪器设备上。
17.在实验过程中遇到仪器故障或问题应及时告知实验室主任。在实验室主任帮助操作仪器、做操作或实验演示时，要认真听讲。
18. 实验完毕及时关闭和清理设备：
（1）仪器恢复到初始状态：将荧光光路上的 ND滤片全部拉出、 将光路切换到目视观察位置、 载物台位置复位、ZDC或者PFS置于OUT 位置、倒置（正置）显微镜的物镜放置到Z轴最低（高）位置。 按每台仪器的关机步骤关闭仪器。
（2）及时清洁物镜，每台显微镜只留一个空气物镜，将不使用的物镜清洁后装入镜盒收纳。
19. 使用气体的实验（活细胞成像实验、需使用灌流系统的实验）结束后，应及时关闭气体阀门。若发现漏气或气阀失灵，应停止实验，立即检查并修复。
20. 使用灌流系统的实验结束后，要及时冲洗灌流系统和清理废物瓶。实验完后将废物瓶的负压泵及时关闭。
21. 冲洗灌流系统的步骤：
（1）将压力调至最小，用10ML的注射器把每一管灌流管中的溶液抽干；
（2）用5ML的注射器向每一管灌流管中注满超纯水，再用10ML的注射器依次抽干，此步骤重复3次；
（3）用5ML的注射器将每一管灌流管中注满超纯水，打开气体压力到80kpa，检查每一管灌流管是否通畅，如有堵塞，用10ML的注射器倒吸管子里的堵塞物；
（4）等溶液全部流完后，将压力调至最小，关闭气体阀门。
22. 灌流系统每 1－2 月彻底清洗一次，由组长负责清洗：
（1）配置5% 浓度的84消毒液，用5ML的注射器注入到每一管灌流管，浸泡40分钟，用10ML的注射器依次抽干灌流管内溶液，用超纯水清洗3遍；
（2）把灌流系统上的三通以及所有软管和电极头拆下，分别用5% 浓度的84 消毒液冲洗浸泡，最后用超纯水浸泡冲洗。清洗完后，装回灌流系统，用5ML 注射器将所有灌流管中注满超纯水，冲洗管道10遍；
（3）清洗完后将气体压力关到最小，关闭气体阀门。
23. 物镜清洁注意事项：空气镜和油镜用无水乙醇擦拭。擦拭时应选用物镜专用擦镜纸或长纤维的脱脂棉签，从中心往外呈螺旋形擦拭，或单方向擦拭。严禁来回摩擦镜头。水镜用超纯水清洗，再用擦镜纸擦干。
24. 细胞箱维护注意事项：经常检查二氧化碳气体余量、培养箱的门是否关紧、CO2的浓度和培养箱的温度。及时清理培养箱内剩余的细胞。每2周更换一次培养箱内的超纯水。每2个月彻底清洁培养箱内壁和托盘。每年给培养箱内部加一次超纯水。
2004-5-19
